T4 Polynucleotidkinase 2500 units

Das Enzym katalysiert den Transfer terminaler Phosphatgruppen von ATP auf das 5'-OH-Ende von DNA.

T4 Polynukleotidkinase katalysiert den Transfer von Phosphat von die Gammaposition des ATP zum 5' Hydroxyende von Polynukleotiden (DNA und RNA) oder auch zu Nukleosid-3'-Monophosphat. Das Enzym wird für die Endmarkierung von DNA und RNA für DNA-Sequenzierung und für die Phosphorylierung von 5'-Hydroxy-DNA Fragmenten zur anschließenden Ligation benutzt. Zur kompletten nichtradioaktiven Phosphorylierung von 5'-Hydroxyenden wird ein mehr als 2-facher Überschuß an ATP (100 µM) eingesetzt. Die T4 Polynukleotidkinase Kinase Aktivität ist sehr anfällig gegen Salzzusätze: 150 mM NaCl inhibiert zu mehr als 50%. Da auch schon 10 mM Ammoniumsulfat (manchmal ein Zusatz bei der PCR) zu mehr als 80% inhibiert, ist es ratsam vor der weiteren Verwendung der DNA diese durch Präzipitation zu reinigen.