Proteinase K Pulver 100 mg

Enzym für den kompletten Verdau von Proteinen in Nukleinsäureproben.

Proteinase K, aus dem Pilz Tritirachium album, ist eine unspezifische Serinprotease, die ein sehr breites Erkennungsspektrum zeigt (schneidet die Carboxylenden von aromatischen, hydrophilen und aliphatischen Aminosäuren). Damit ist das Enzym ein hervorragendes Werkzeug zur vollständigen hydrolytischen Spaltung von Proteinen (Ebeling W. et al. (1974) Eur. J. Biochem., 47, 91). Proteinase K wird hauptsächlich in der Nukleinsäurereinigung oder zur Entferung von Nukleasen eingesetzt. Anwendungsbeispiele: Präparation chromosomaler DNA für die PFGE, oder Abbau von Nukleasen bei der Präparation von Nukleinsäuren, einschließlich der Gewinnung nativer RNA. Aktivität: (Hämoglobin, pH7,5; 25°C) 30 mAnsonU/mg. Fremdaktivität: RNase und DNase nicht nachweisbar. Temperatur-Optimum: +65°C (Die Aktivität ist bei +65°C ca. 12x höher als bei +25°C). Über +65°C erfolgt Inaktivierung durch Denaturierung. Stabil von pH4,0-12,5. Aktivatoren: Denaturierende Agenzien wie SDS und Harnstoff. Inhibitoren: Hg2+, DFP, PMSF und Phenol. Keine Inhibition durch EDTA, Sulfhydryl-Reagenzien und Trypsin bzw. Chymotrypsininhibitoren. Stabilisatoren: Ca2+ (1-5 mM) verhindern die Autolyse. Anwendungshinweise: Reaktionspuffer: 50mM Tris-HCl; pH7,5; 5mM CaCl2; 0,5% SDS. Übliche Stammlösung: 20mg/mL in Wasser. Lagertemperatur der Stammlösung: -18°C. Übliche Arbeitskonzentration: 50µg/mL. Durch Zugabe von 25mL Puffer oder Wasser kann direkt eine Stammlösung mit einer Konzentration von 20mg/mL angesetzt werden.