Methylenblau DNA-Färbelösung 10 mL

Ungiftige Lösung zum färben von DNA in Agarosegelen. 200-fach konzentrierte Lösung, die mehrfach verwendet werden kann. Sensitivität: ca. 10ng DNA pro Bande können nachgewiesen werden.

Zur Anfärbung eines Agarosegels mit den Abmessungen ca. 80 x 60 mm (B x L) und einer Dicke von 3 - 4 mm, werden ca. 50mL 1X DNA-Dye Methylenblau - Färbelösung benötigt. Bereiche des Gels, die nicht für die DNA-Auftrennung benutzt wurden, sollten - z. B. mittels der Kante eines Lineals - auf ein entsprechendes Format verkleinert werden. Das Gel sollte ca. 5mm mit Färbelösung bedeckt und frei schwimmen können. Zur Herstellung der gebrauchsfertigen DNA-Dye Methylenblau - Färbelösung werden 250µL in 50mL Wasser verdünnt. Das Gel wird unter gelegentlichem Schütteln für ca. 20 Minuten gefärbt. Zur Sichtbarmachung der Banden (Färbedifferenzierung) wird mehrfach für ca. 5 - 10 Minuten mit Leitungswasser entfärbt. Die blau gefärbten DNA-Banden sind im Durchlicht gut sichtbar und können durch Vermessen mit dem Lineal oder mittels Fotografie dokumentiert werden. Die Methylenblaufärbung von DNA ist nicht permanent, d.h. abhängig von z. B. der Geldicke und der Lagertemperatur können sich die DNA-Banden (insbesondere kleinere Fragmente) nach einiger Zeit wieder entfärben. Die angesetzte 1X Methylenblaufärbelösung kann in einer geeigneten Braunglas-Vorratsflasche bei 2-8°C über 4 - 6 Monate gelagert und mehrfach verwendet werden. Die Färbezeit ist bei der zweiten Anwendung um ca. 20% zu verlängern, desgleichen bei der dritten Anwendung. Danach ist der Farbstoff weitgehend verbraucht und es sollte eine neue Gebrauchslösung angesetzt werden. Es können Banden einer 1kb Ladder (Auftragsmenge 1?g; Massenverteilung pro Bande zwischen 10 und ca. 200ng) ohne Probleme angefärbt werden. Auch kleinere Fragmente lassen sich anfärben (150bp). Entscheidend für die Sensitivität ist die Geldicke, das Verhältnis Gel : Färbelösung und die Entfärbezeit. Durch Ausprobieren der Färbebedingungen werden Sie relativ leicht die für Ihr System optimalen Konditionen ermitteln.