Blasticidin S Hydrochloride 10 mg

Blasticidin S gehört zu den Nukleosid-Antibiotika und wurde aus Streptomyces griseochromogenes isoliert. Es hemmt die Proteinsynthese in Prokaryoten und Eukaryoten durch Verhinderung der Bildung der Peptidbindung. Inzwischen wurden verschiedene Blasticidin-Resistenzgene isoliert (eine Acetyltransferase [bls] und zwei Deaminasen [bsr und BSD]. Die Gene der Deaminasen werden als Selektionsmarker eingesetzt. Blasticidin S - Hydrochlorid ist als Salz sehr gut in Wasser oder Puffern (z. B. HEPES) löslich. Die Arbeitskonzentration hängt von den gewählten Organismen ab. Für E. coli werden in der Regel 25-100?g/mL Blasticidin S eingesetzt, für Säugerzellen nur 1 bis 10?g/mL, in einigen Fällen auch bis 30 ?g/mL. Da die Angaben relativ stark schwanken, sollte jeweils die wirklich benötigte Konzentration von Zelllinie zu Zelllinie bzw. Organismus ermittelt werden. Hohe Salzkonzentrationen hemmen, bzw. inaktivieren Blasticidin S. Daher muss bei Selektion von Blasticidin S-resistenten E. coli die Natriumchlorid-Konzentration von 10 auf 5g/L im LB-Medium / LB-Agar reduziert werden. Alternativ muss die Blasticidin-Konzentration erhöht werden. Stabilität: Der Feststoff ist bei 4°C mindestens 2 Jahre haltbar. Es empfiehlt sich angesetzte Lösungen sterilzufiltrieren. Als Stammlösung kann eine 50mg/mL Lösung hergestellt werden. Der pH-Wert der Lösung darf wegen Inaktivierung von Blasticidin S pH7 nicht überschreiten. Lösungen sind bei 4°C ca. 2 Wochen stabil und eingefroren bei -20°C ca. 2 Monate. Aliquots sollten nicht wiederholt aufgetaut/eingefroren werden.